一、目的
规范生物安全柜的操作、日常维护及定期校准流程，保障操作人员安全，确保实验环境无菌，延长设备使用寿命，符合生物安全及行业相关法规要求。
二、适用范围
适用于深圳市英乐斐科技有限公司生物安全柜（含二级A2型、B2型等常用型号）的操作、日常维护、定期校验及相关人员管理。
三、职责
（一）操作人员
1. 严格遵守本SOP进行生物安全柜日常操作，确保操作规范、安全。
2. 每日操作前完成设备外观及运行状态初步检查，发现异常及时上报。
3. 负责操作后设备的清洁、消毒及台面整理。
（二）设备管理员
1. 统筹生物安全柜的维护、校准计划，建立设备维护档案。
2. 组织操作人员进行SOP培训及考核，确保人员持证上岗。
3. 对接外部校准机构，监督校准过程，审核校准报告。
4. 定期检查维护记录，及时处理设备故障及报修。
（三）技术支持人员
1. 负责设备故障的技术排查、维修及售后对接。
2. 提供设备维护的技术指导，解答操作及维护中的专业问题。
3. 参与设备年度性能验证，出具技术验证报告。
四、生物安全柜基础知识
（一）核心原理
通过风机驱动空气循环，经预过滤器、高效微粒空气过滤器（HEPA）过滤，形成垂直单向气流屏障，既阻挡实验室内污染空气进入操作区，也防止操作区内有害气溶胶外泄，同时保障操作区无菌环境。
（二）常见类型及适用场景
类型 核心特点 适用场景
二级A2型 70%循环空气+30%外排，噪音低，能耗小 普通微生物实验、样本处理、基础无菌操作
二级B2型 100%全新风外排，无循环空气，污染零泄漏 高致病性微生物实验、放射性物质结合实验、无菌制剂配制
五、操作前准备（每日开机前）
（一）环境检查
1. 检查实验室内温湿度：温度控制在18-26℃，相对湿度45%-65%，无阳光直射、无强气流干扰（如空调出风口直吹）。
2. 确认实验室内无人员频繁走动，减少室内空气流动对安全柜气流屏障的影响。
3. 清理安全柜周边1米范围内杂物，保持通风通畅，避免堵塞设备进风口、排风口。
（二）设备外观及状态检查
1. 外观检查：查看柜体有无破损、变形，玻璃门/视窗无裂纹、密封良好；密封条无老化、脱落、松动。
2. 风机状态：开机前观察风机是否正常待机，无异常异响、震动。
3. 过滤器状态：检查预过滤器无明显积尘、堵塞，若积尘厚度超过1mm需提前更换。
4. 报警系统：开机后检查报警灯、显示屏无异常，报警功能正常。
（三）个人防护准备
1. 操作人员更换实验服，佩戴一次性医用口罩、无菌手套、防护服，长发需扎起，避免接触实验物品及气流。
2. 提前30分钟开启安全柜，进行紫外消毒+通风预处理（具体见后续操作流程）。
六、标准操作流程
（一）开机与预处理
1. 接通设备电源，按下开机键，设备进入自检程序（自检内容包括风机、过滤器、报警系统、风速传感器等），自检时长约3-5分钟。
2. 自检通过后，设备进入正常运行状态，首次开机需持续通风30分钟，后续每日操作前通风15分钟，以净化操作区空气。
3. 若需进行无菌实验，开启紫外灯，照射20-30分钟；实验结束后关闭紫外灯，保留风机运行5-10分钟，排出残留气溶胶。
（二）物品入柜与操作规范
1. 物品入柜前处理：所有实验用品（试剂、耗材、样本等）需经75%酒精表面消毒，晾干后放入安全柜内。
2. 物品摆放原则：
- 实验物品与安全柜内壁、过滤器保持≥15cm距离，与玻璃门保持≥10cm距离，避免阻挡气流。
- 样本、试剂分类摆放，污染物品与无菌物品分区放置，避免交叉污染。
3. 操作动作规范：
- 操作人员手臂入柜时，动作缓慢平稳，避免大幅度晃动破坏气流屏障。
- 实验过程中尽量减少玻璃门开启幅度（开启高度不超过15cm），缩短开启时间。
- 严禁在安全柜内进行明火实验（如酒精灯、酒精喷灯），若需加热操作，使用电子恒温加热器；禁止处理挥发性有毒、易燃化学品。
（三）实验结束后操作
1. 实验结束后，先关闭实验仪器，保留安全柜风机运行5-10分钟，排出实验过程中产生的气溶胶。
2. 清洁消毒：
- 用75%酒精或0.5%含氯消毒剂擦拭安全柜内部台面、内壁、玻璃门内侧，遵循“从上到下、从里到外”顺序，确保无死角。
- 清理实验废弃物，按生物安全等级分类处理：感染性废弃物放入专用黄色医疗垃圾袋，锐器放入防刺穿锐器盒。
3. 关闭设备：待风机运行结束后，按下关机键，切断电源；若设备长期不使用（超过7天），需断开电源，覆盖防尘罩。
七、日常维护流程
（一）每日维护（操作人员执行）
1. 重复“操作前准备”中的设备状态检查，记录设备运行参数（风速、压差、运行时长）。
2. 实验结束后，完成设备清洁消毒，填写《生物安全柜每日运行维护记录表》。
（二）每周维护（设备管理员组织，操作人员配合）
1. 检查预过滤器：若积尘厚度≥1mm，及时更换预过滤器（更换步骤：断电→打开柜体后侧预过滤器盖板→取出旧过滤器→装入新过滤器→拧紧盖板→通电测试）。
2. 清洁设备外部：用干净抹布擦拭柜体外壳、控制面板，保持设备清洁。
3. 检查报警功能：模拟故障（如风速异常、门体开启超时），测试报警灯、蜂鸣器是否正常触发。
（三）每月维护（技术支持人员执行）
1. 检测风速：使用专业风速计，在安全柜操作区均匀选取5个检测点，测量风速，确保二级A2型风速≥0.35m/s，二级B2型风速≥0.5m/s，若偏差超出范围需调整风机参数。
2. 检查HEPA过滤器：通过压差表监测过滤器两端压差，若压差≥初始压差的1.5倍，提示过滤器堵塞，需联系技术人员评估更换。
3. 润滑风机电机：对风机轴承添加专用润滑油（每6个月一次），减少设备噪音及磨损。
（四）年度维护与校准（技术支持+外部机构执行）
1. 性能验证：每年委托具备资质的第三方机构，对设备进行全面性能检测，包括风速均匀性、气流流线、噪音、泄漏率等，出具《生物安全柜校准报告》。
2. HEPA过滤器更换：若年度检测中过滤器泄漏率超标、压差超限，或使用时长达到3-5年，需及时更换HEPA过滤器（更换需由专业技术人员操作，更换后需重新校准）。
3. 电气系统检查：检测设备线路、接地、电源模块是否正常，排除电气安全隐患。
八、故障处理流程
（一）常见故障及应急处理
故障现象 可能原因 应急处理措施
开机后报警，风速异常 过滤器堵塞、风机故障、电源波动 1. 检查预过滤器，及时更换；2. 断电重启，排查电源问题；3. 若无效，联系技术支持
玻璃门开启后无报警 门体传感器故障、线路接触不良 1. 检查传感器连接是否松动；2. 手动测试报警功能；3. 故障未排除前禁止使用
设备运行噪音过大 风机轴承磨损、物品摆放阻挡气流 1. 清理物品，确保气流通畅；2. 联系技术人员润滑或更换轴承
内部消毒后有异味 消毒剂残留、过滤器吸附污染气溶胶 1. 延长风机运行时间，通风排味；2. 更换消毒剂，规范清洁；3. 检查过滤器是否污染
（二）故障上报与维修
1. 发现设备故障后，操作人员立即停止使用，悬挂“设备故障，禁止使用”标识，上报设备管理员。
2. 设备管理员初步排查，无法解决的联系技术支持或设备厂家售后，填写《设备故障报修单》。
3. 维修完成后，技术人员需测试设备性能，确认正常后方可重新投入使用，并将维修记录归档。
九、安全注意事项
1. 生物安全柜为专用设备，严禁挪作他用（如存放非实验物品、堆放杂物）。
2. 操作过程中若发生样本泄漏，立即停止操作，关闭玻璃门，用消毒剂覆盖泄漏区域，静置30分钟后再按规范清理，避免气溶胶扩散。
3. 维护、校准设备时，必须断电操作，做好安全防护，避免触电；更换过滤器时，需佩戴防护口罩、手套，防止过滤器粉尘吸入。
4. 严禁私自拆卸设备核心部件（如HEPA过滤器、风机模块），如需操作必须由专业技术人员执行。
5. 定期对操作人员进行生物安全及SOP培训，考核合格后方可上岗，培训记录留存归档。
十、记录管理
1. 建立《生物安全柜每日运行维护记录表》《生物安全柜年度校准报告》《设备故障报修单》，由设备管理员统一保管。
2. 记录需完整填写，包括设备编号、维护日期、维护内容、操作人员、校准结果、故障处理情况等，保存期限不少于设备使用年限。
3. 记录需定期整理，作为设备性能评估、维护计划调整的依据，同时符合生物安全行业审计要求。
十一、附件
1. 生物安全柜每日运行维护记录表（模板）
2. 生物安全柜故障报修单（模板）
3. 预过滤器/HEPA过滤器更换操作图解
4. 生物安全柜校准参数标准表